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綿羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶聯免疫方法
更新時間:2014-09-09   點擊次數:1979次

綿羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶聯免疫方法使用目的:

本試劑盒用于測定綿羊血清、血漿及相關液體樣本中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中綿羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)水平。用純化的綿羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入分泌型免疫球蛋白A(SIgA),再與HRP標記的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中綿羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)濃度。 

試劑盒組成 

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品(80μg/ml)

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

綿羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶聯免疫方法標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

40μg/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

20μg/ml

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

10μg/ml

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

5μg/ml

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.5μg/ml

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉)。
測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

E-(Hu)(05)-02992 人白介素11(IL-11)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02993 人白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02994 人白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-1 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02995 人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: TR ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02996 人八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: OTF2B ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02997 人八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: OTF2A ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02998 人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: ECHO IgM ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02999 人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA檢測試劑盒 ,英文名: CEF  ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
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E-(Hu)(05)-03002 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: AGPs ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-03003 人阿黑皮素原(POMC)ELISA檢測試劑盒 ,綿羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶聯免疫方法英文名: POMC ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-03004 人阿黑皮素原(POMC)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: POMC ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T

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