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我司點(diǎn)撥:ELISA這些常見實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)缺點(diǎn)
更新時(shí)間:2021-03-16   點(diǎn)擊次數(shù):1473次
 
ELISA 實(shí)驗(yàn)是科研人員經(jīng)常用到的實(shí)驗(yàn)方法。很多人覺得ELISA很簡單,其實(shí)不然。今天豐壽就帶大家了解下ELISA實(shí)驗(yàn)的原理和常見辦法。
 
實(shí)驗(yàn)原理
 
1.包被:抗原/抗體,固相化
 
2.反響: 1)待測抗體/抗原; 2)酶標(biāo)抗原/抗體
 
3.洗滌:使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的別離
 
4.底物顯色:定性/定量剖析
 
常用辦法
 
1.間接法
 
檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。
 
優(yōu)勢:二抗能夠加強(qiáng)信號,并且有多種挑選能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保留它多的免疫反響性。
 
缺陷:交互反響發(fā)生的機(jī)率較高
 
2.雙抗體夾心法
 
檢測大分子抗原常用的辦法。
 
優(yōu)勢:高活絡(luò)、高專一性,抗原無須事前純化。
 
缺陷:抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
 
3.競爭法
 
檢測小分子半抗原(藥物、激素等)。
 
優(yōu)勢:可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
 
缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。
 
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